磷酸鈣法細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒注意無菌操作

信帆生物生物試劑的磷酸鈣法細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒(Calcium Phosphate Cell Transfection Kit)，在傳統(tǒng)的磷酸鈣細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法的基礎(chǔ)上 進(jìn)行了改良，提高了轉(zhuǎn)染效率，并降低了毒性。用磷酸鈣法轉(zhuǎn)染細(xì)胞，不僅可以瞬時表達(dá)，也可以篩選穩(wěn)定株。

規(guī)格：200T
保存：—20℃
有效期：12個月
用途：用于磷酸鈣法轉(zhuǎn)染細(xì)胞,適合于大多數(shù)貼壁細(xì)胞的轉(zhuǎn)染
說明：HEK293是適合磷酸鈣法轉(zhuǎn)染的細(xì)胞之一,優(yōu)化條件后轉(zhuǎn)染效率可以高達(dá)85%以上,一般的轉(zhuǎn)染效率可達(dá)40～50%左右。注意無菌操作。

HEK293或HEK293T細(xì)胞，即通常所謂的293細(xì)胞，適合磷酸鈣法轉(zhuǎn)染的細(xì)胞之一，優(yōu)化條件后轉(zhuǎn)染效率可以高達(dá) 90% 以上；通常很容易達(dá)到40-50%左右的轉(zhuǎn)染效率。大多數(shù)常見的細(xì)胞例如Hela細(xì)胞、CHO細(xì)胞等也都適合磷酸鈣法轉(zhuǎn)染，但效率比293細(xì)胞要略低一些。
 

本試劑盒不僅適合于大多數(shù)貼壁細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，也適用于一些懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染。本試劑盒提供的試劑都經(jīng)無菌處理，可以直接使用。

注意事項： 
 

1、轉(zhuǎn)染時，把DNA-氯化鈣溶液加入到BBS溶液中，不要把BBS溶液加入到DNA-氯化鈣溶液中。 ?

2、高純度的質(zhì)粒是獲得高轉(zhuǎn)染效率的必要條件，要確保A260/A280大于1.8，并且電泳檢測抽提到的質(zhì)粒90 ％以上都是超螺 旋。 ? 
 

3、在用磷酸鈣法轉(zhuǎn)染細(xì)胞時應(yīng)使用濃度不高于5%的二氧化碳，二氧化碳的濃度為3%左右。 ? 
 

4、BBS溶液的pH值直接關(guān)系到轉(zhuǎn)染效率，盡量避免把BBS溶液長時間暴露在空氣中，以免被空氣中的二氧化碳酸化。 ?
 

5、 轉(zhuǎn)染時由于質(zhì)粒不同、細(xì)胞不同，質(zhì)粒用量需自行摸索。 ?6、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作