α-淀粉酶檢測試劑盒使用說明！

產品說明：

淀粉水解酶，包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。α-AL (EC 3.2.1.1)隨機催化淀粉中α-1,4-糖苷鍵水解，生成葡萄糖、麥芽糖、麥芽三糖、糊精等還原糖，同時使淀粉的粘度降低，因此又稱為液化酶。淀粉水解酶催化淀粉水解生成還原糖，還原糖還原 3,5-二硝基水楊酸生成棕紅色物質，在 540 nm有吸收峰；通過測定 540 nm 吸光度增加速率，計算淀粉酶活性。α-AL 耐熱，但是β-淀粉酶可在 70℃鈍化 15min。因此粗酶液經過 70℃鈍化 15min，就只有α-AL 能夠催化淀粉水解。

操作步驟：

一、粗酶液提取：

稱取約 0.1g 樣本，加 0.8 mL 蒸餾水勻漿；勻漿后在室溫下放置提取 15min，每隔 5min 振蕩 1次，使其充分提取；6000g，室溫離心 10min，吸取上清液并且加蒸餾水定容至 10 mL，搖勻，即為淀粉酶原液。

淀粉酶是水解淀粉和糖原的酶類總稱，通常通過淀粉酶催化水解織物上的淀粉漿料，由于淀粉酶的性及專一性，酶退漿的退漿率高，退漿快，污染少，產品比酸法、堿法更柔軟，且不損傷纖維。淀粉酶的種類很多，根據織物不同，設備組合不同，工藝流程也不同，目前所用的退漿方法有浸漬法、堆置法、卷染法、連續洗等，由于淀粉酶退漿機械作用小，水的用量少，可以在低溫條件下達到退漿效果，具有鮮明的環保特色。

α-淀粉酶活性計算：

1、標準曲線的繪制

以ΔA 標準為 y 軸，以標準溶液濃度為 x 軸，繪制標準曲線，得到方程 y=kx+b。將ΔA 測定帶入

方程得到 x（mg/mL）。

2、α- 淀粉酶活性的計算

（1）按照樣本鮮重計算

單位定義：每g 組織每分鐘催化產生1mg 還原糖定義為1 個酶活力單位。

α- 淀粉酶活性(mg/min/g 鮮重)=x×V 樣÷(W×V 樣÷V 樣總)÷T=2×x÷W

（2）按照蛋白質濃度計算

單位定義：每mg 組織蛋白每分鐘催化產生1mg 還原糖定義為1 個酶活性單位。

α-淀粉酶活性(mg/min/mg prot)= x×V 樣÷（V 樣×Cpr）÷T=0.2×x÷Cpr

V 樣：加入反應體系中樣本體積，0.075 mL；V 樣總：提取液總體積，10 mL； Cpr：樣本蛋

白質濃度，mg/mL；W：樣本鮮重，g；T：反應時間，5min。

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