2025版明膠酶譜法MMP-2&MMP-9檢測試劑盒現貨供應

檢測原理：

本試劑盒采用凝膠反相酶譜法(Zymography)檢測MMP-2、MMP-9 活性及其無活性前體酶原譜系。Zymography 是一種廣為使用的、基于SDS-PAGE 電泳和反相凝膠染色的蛋白酶檢測方法，其靈敏度可達1 nM，高于ELISA方法，其基本原理和程序是：制備含有膠原酶底物的SDS-PAGE凝膠，含蛋白酶的樣

品在此凝膠中進行電泳，電泳時SDS與樣本中的MMP可逆性結合，導致MMP氫鍵和疏水鍵破壞而不能發揮分解明膠的作用。電泳結束后取出凝膠與酶反應Buffer孵育，MMP恢復活性，凝膠中由于含底物蛋白而被深染，形成深色背景，但在有蛋白酶條帶的位置，蛋白酶將降解凝膠中的底物蛋白，因而不被染色而形成透亮區域，從而能同時指示MMP-2、MMP-9 的大小位置(酶譜)及活性。本試劑盒提供MMP-2、MMP-9 特異蛋白底物及酶學反應緩沖液，可檢測少至0.1~0.5 μl 血液中的MMP-2、MMP-9 酶譜及活性，檢測靈敏度~1nM。試劑盒可進行50次標準小膠檢測，如果小膠加樣孔為10~15個，則總計可最多檢測超過500個樣品。

染色步驟：

1. 此染色液即為工作液，使用時直接將聚丙烯酰胺凝膠放在培養皿中以考馬斯亮藍染色液覆蓋凝

膠，并緩慢搖動2h；

2. 傾去染色液，用脫色液沖洗凝膠；

3. 以脫色液覆蓋凝膠，緩慢搖動2h，傾去脫色液，再加入新脫色液進行脫色，直至出現透亮區域，此透亮區域為 MMP 條帶的位置。（通常此過程需要 2～4h，也可脫色過夜至出現清晰透亮條帶和干凈的背景）；

4. 對凝膠進行分析和照相，凝膠可放置在7％的乙酸中保存。也可用凝膠干膠裝置對凝膠進行處理后保存。

說明：

A. 染色液含有甲醇，呈酸性，具有輕微腐蝕性，請穿戴好實驗服和一次性實驗手套，不要直接接觸。       嚴禁入口。使用完成后，請密封保存；

B. 自配脫色液配方：冰醋酸:甲醇:水＝7:5:88（V:V:V）；

C. 保存液：7％冰醋酸；

D. 凝膠染色之后，染色液可以回收利用，裝入新容器內，4oC保存，可反復使用2-3次。